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联合分析之ceRNA研究策略

作者:联川生物技术公司 2016-10-11T08:34 (访问量:7563)

哐哐哐~小编又来给大家发福利啦~
今天我们的精选案例是之前“从“一”到“多”的联合分析”(点此查看)中的方案二,下面跟着小编一起来收干货吧~

鉴定与分析玉米lincRNAs作为miRNA靶标或诱饵的功能

Genome-wide identification and functional analysis of lincRNAs acting as miRNA targets or decoys in maize

研究物种:玉米

发表期刊:BMC Genomics(2015)
IF:3.986
目的:
研究植物中lincRNA与miRNA的互作关系
数据:
玉米lincRNAs、miRNA及降解组数据
主要工具:
miRNA测序 + lncRNA测序 + 降解组测序
数据分析:
miRNA靶基因预测,GO富集分析、Cytoscape

图表展示:

图 miRNA靶基因lncRNAs与mRNA共表达网络图

结果:

1.为验证34个miRNA相应的靶lincRNAs的功能,构建了lincRNAs和mRNA共表达网络图,发现32个 lincRNAs可以与9043个mRNA共表达。
2.使用78个miRNA,117个lincRNA,8834个mRNA绘制网络图,发现lincRNA作为miRNA靶标的有42对,lincRNA作为miRNA诱的有104对
3..miRNA靶基因预测出86个lincRNA可能作为58个miRNA的诱饵,共形成104对miRNA-lincRNA关系对。保守性分析显示,诱饵位点具有一定的保守性。

lncRNA-FER1L4以ceRNA方式调控PTEN表达,抑制肿瘤细胞生长
Long noncoding RNA FER1L4 suppresses cancer cell growth by acting as a competing endogenous RNA and regulating PTEN expression
研究物种:人

发表期刊:Scientific Reports(2015)

IF:5.228
目的:
LncRNA-FER1L4在胃癌中发挥怎样的生物学功能
取材:
胃癌细胞系AGS,MGC-803,SGC-7901和正常胃表皮细胞系GES-1
主要工具:
miRNA测序 + lncRNA 测序
数据分析:
miRNA靶基因预测,细胞周期分析,SPSS数据分析

图表展示:

图 与PTEN相关的ceRNA网络图

结果:
1.对胃癌细胞系AGS,MGC-803,SGC-7901和正常胃表皮细胞系GES-1中FER1l4的表达进行了检测,发现癌细胞系中表达水平明显降低。并检测了20个胃癌组织样本,发现高表达FER1L4的样本中伴随着高PTEN的表达。

2.研究发现miR-106a-5p过表达会显著降低靶向lncRNA和mRNA的表达;抑制miR-106a-5p的表达导致游离的FER1L4和PTEN mRNA增加。证实该lncRNA和mRNA是同一个miRNA的靶基因。

3.敲降FER1L4,发现miR-106a-5p的表达显著增加,qRT-PCR和western blot检测发现PTEN的mRNA和蛋白水平发现都显著性减少。表明lncRNA的表达异常会影响miRNA的表达,而miRNA的表达异常也会引起下游相应靶基因的表达。表明lncRNA影响miRNA和mRNA的表达。
4.对敲降FER1L4的GES-1, AGS, MGC-803 和 SGC-7901细胞系流式细胞检测,发现FER1L4的下调促进了G0/G1到S期的转化。同时,胃癌细胞系的细胞增殖加速。

整合分析mRNA-miRNA-circRNA测序数据揭示化学物致癌新观点
High-throughput data integration of RNA–miRNA–circRNA reveals novel insights into mechanisms of benzo[a]pyrene-induced carcinogenicity
研究物种:人
发表期刊:Nucleic Acids Research(2015)

IF:9.202

目的:研究miRNA、mRNA和circRNA之间的ceRNA网络揭示化学物致癌机制

取材:

暴露于强致癌物BaP不同时间的人类HepG2肝细胞主要工具:miRNA测序 + circRNA测序

数据分析:

miRNA靶基因预测,miRNA差异表达分析,circRNA预测
图表展示:

图 致癌机制假说

结果:
1.时序实验发现miR-181a-1_3p随着时间变化表达一直下调。以其为研究对象,寻找在BaP作用下的调控机制。

2.靶基因预测发现,有14个差异表达mRNA(包括DNA修复基因MGMT)和16个差异表达的circRNA具有miR-181a-1_3p的作用位点。

3.数据分析发现,随着时间的变化,miR-181a-1_3p、MGMT和circRNA具有一定的表达相关性。
4.研究发现,在BaP作用下,会超量表达miR-181a-1_3p,从而抑制MGMT的翻译,抑制DNA损伤修复;随着时间的增加,circRNA的表达量增加,竞争性结合miR-181a-1_3p,从而解放MGMT,一定程度上可对DNA损伤进行修复。

ceRNA研究策略

1.mRNA,lncRNA,或circRNA拥有共同的MRE
2.ceRNA的两个(或多个)基因具有表达正相关性

3.ceRNA的两个(或多个)基因的正相关性由相同的miRNA调控

4.实验验证三者间的ceRNA调控关系

5.实验揭示ceRNA的生物学功能

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