抗体表征测定主要涉及对抗体的结构、功能及其他特性的分析和鉴定。抗体是机体免疫系统的组成部分，能够识别并中和外来病原体，如病毒和细菌。抗体表征测定的作用在于帮助研究人员和临床医生全面了解抗体的各种特性，包括其结合特异性、亲和力、稳定性、纯度等。这些特性直接影响抗体的功能和疗效。在研发新型抗体药物或疫苗时，抗体表征测定可以用于验证抗体的结合特异性和亲和力，确保其能够有效靶向疾病相关抗原。此外，在质量控制过程中，抗体表征测定还可以帮助检测抗体样品中的杂质和降解产物，保障产品的高纯度和稳定性。因此，了解和掌握抗体的特性可确保其在临床应用中的安全性和有效性。抗体表征测定是全面评估抗体性质的关键流程，能够确保抗体质量、理解其功能及开展后续应用（如生物医药研发），涵盖多个维度的分析，具体如下：

1、纯度分析

（1）SDS-PAGE 电泳：十二烷基硫酸钠 - 聚丙烯酰胺凝胶电泳利用 SDS 使蛋白质变性，带上大量负电荷，依据分子量大小在凝胶中电泳分离。还原条件下，抗体的重链、轻链会分开，借此观察有无杂蛋白带，判断纯度；非还原条件能保留抗体天然结构，用于检测聚合体等大分子杂质。

（2）CE-SDS：毛细管电泳结合 SDS，让抗体形成 SDS - 蛋白复合物，在毛细管内按分子量快速分离。具有分辨率高、分析速度快、样本量需求少的优势，可精准识别不同分子量杂质，测定纯度。

（3）SEC-HPLC：尺寸排阻高效液相色谱基于分子大小进行分离，大分子先流出，小分子后流出。能检测抗体聚集体、片段等杂质，同时给出不同分子量组分相对含量，直观呈现纯度情况。

2、完整性与分子量测定

（1）MALDI-TOF MS：基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱，将抗体与基质混合，经激光脉冲离子化，离子依质荷比在飞行管飞行，依飞行时间测定分子量。测量范围广、精度高，还可分析抗体糖基化修饰后的分子量变化。

（2）ESI-MS：电喷雾电离质谱，溶液中抗体在高电场下形成带电液滴，经去溶剂化形成气态离子，测其质荷比推知分子量 ，适合分析大分子量且易带电荷的抗体。

3、 电荷异构体分析

（1）等电聚焦电泳（IEF）：依据蛋白质等电点差异在 pH 梯度胶内聚焦分离。不同电荷异构体等电点有别，聚焦在凝胶不同位置，经染色显现，据此了解电荷分布，判断异构体比例。

（2）离子交换色谱（IEX）：利用抗体与离子交换剂表面离子基团的静电相互作用，依电荷差异洗脱分离，搭配紫外或荧光检测器，定量分析各电荷异构体。

4、亲和力测定

（1）表面等离子共振（SPR）：将抗体固定于传感器芯片，注入抗原溶液，抗原与抗体结合引发芯片表面折射率变化，实时监测结合与解离过程，根据传感图计算亲和力常数，精准反映二者结合强度。

（2）生物膜层干涉技术（BLI）：光纤生物传感器尖端固定抗体，浸入抗原溶液，二者结合使生物膜厚度改变，干涉光谱随之变化，由此测定亲和力，操作简便、通量较高。

5、抗原结合特异性分析

（1）ELISA：酶联免疫吸附测定，将抗原包被于微孔板，加入待检抗体与酶标二抗，经显色反应，依吸光度判断抗体与抗原特异性结合情况，灵敏度高、适合高通量筛选。

（2）Western blot：蛋白质经电泳转移至膜上，用抗体孵育，若特异性结合，再用标记二抗显色，验证抗体与靶抗原识别能力。

6、抗体活性测定

（1）细胞水平功能实验：例如抗体依赖性细胞介导的细胞毒性（ADCC）实验，检测抗体招募免疫细胞杀伤靶细胞的能力；补体依赖性细胞毒性（CDC）实验，看抗体激活补体系统裂解靶细胞的效率，真实反映体内生物学功能。

（2）中和实验：针对有中和活性的抗体，将抗体与病毒、毒素等致病因子共孵育，再作用于敏感细胞或动物模型，观察致病效果是否被抑制，测定其中和能力。

7、糖基化分析

（1）HPLC：高效液相色谱搭配不同检测器，分离鉴定糖链结构、测定糖基化程度，依保留时间、峰面积量化分析。

（2）质谱：无论 MALDI - TOF 还是 ESI - MS，都能解析糖链组成、连接方式及修饰位点，是深度剖析糖基化的有力工具。

常见方法

1、质谱分析：通过质谱分析，可以准确鉴定抗体的氨基酸序列和翻译后修饰，从而帮助研究人员了解抗体的结构和功能。

2、等电聚焦：等电聚焦用于测定抗体的等电点（pI），是鉴定抗体纯度和异质性的手段。通过分离不同pI的抗体分子，等电聚焦能够识别抗体样品中的微小变异。

3、动态光散射：动态光散射用于评估抗体分子的粒径分布和聚集状态。该方法能够快速提供有关抗体稳定性的信息，有助于优化抗体的制备及储存条件。

4、表面等离子体共振：此技术用于测量抗体与抗原之间的相互作用，包括结合亲和力和动力学参数。通过实时分析抗体与抗原的相互作用，表面等离子体共振能够为抗体的功能性研究提供关键数据。

在蛋白质组学领域，百泰派克生物科技凭借其丰富的经验和先进的技术，提供全面的抗体表征测定服务。我们的团队致力于为客户提供高质量的分析结果，确保抗体在研发和应用中的高效性和安全性。凭借专业的技术支持和个性化的服务，我们期待成为您在抗体研究与开发中的可靠合作伙伴。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

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